Novinky pro pediatry

Opsonofagocytární assay – princip testu k hodnocení funkční zdatnosti protilátek po očkování proti pneumokokům

Opsonofagocytární assay (OPA) je imunologickým funkčním testem, který hodnotí funkční zdatnost protilátek.

Opsonofagocytární assay – princip testu k hodnocení funkční zdatnosti protilátek po očkování proti pneumokokům

Opsonofagocytární assay (OPA) je imunologickým funkčním testem, který hodnotí funkční zdatnost protilátek. Tato metoda není používána při rutinních imunologických vyšetřeních, a pro mnohé odborníky tedy není její podstata přesně známa. Jak už název napovídá, metoda hodnotí schopnost opsonizace a následné likvidace patogenu protilátkami, které se nacházejí v séru. Je to tedy test funkční zdatnosti těchto protilátek.

Při stanovení koncentrace protilátek pomocí rutinních metod, nejčastěji ELISA, stanovíme pouze koncentraci protilátek, o jejich funkční zdatnosti ale ELISA příliš vypovídat nemusí. V řadě situací sice platí, že čím vyšší je koncentrace protilátek, tím lepší je ochrana, neplatí to však absolutně. Některé antigeny totiž ukázaly, že ani vysoká koncentrace protilátek nechrání před onemocněním dostatečně a naopak, i nižší koncentrace mohou poskytnout ochranu dostatečnou.

Pro hodnocení nových pneumokokových vakcín vyvstala potřeba testu funkční aktivity. Ochrana proti pneumokokům je závislá hlavně na protilátkách, které účinně opsonizují polysacharidové pouzdro pneumokoku. Bez opsonizace jsou bakterie právě díky pouzdru jen velmi obtížně pohlcovány makrofágy. Po opsonizaci protilátkami dojde k účinné likvidaci bakterií.

K preciznějšímu zhodnocení těchto situací byla vyvinuta OPA. Sérum pacienta je po inaktivaci endogenního komplementu zahřátím na 56 °C naředěno do několika koncentrací. Postupně jsou do reakce k jednotlivým ředěním séra přidány aktivované fagocytující buňky ze standardní buněčné linie, králičí komplement a standardní koncentrace pneumokoků daného sérotypu.

Po dvouhodinové inkubaci při 37 °C je fagocytóza zastavena ochlazením na ledu a 20 μl směsi je přeneseno do kultivačního média pro pneumokoky a kultivováno přes noc při 37 °C. Poté je zhodnocen počet pneumokokových kolonií. Jako základ pro hodnocení účinnosti zabíjení pneumokoků slouží kontrolní vzorky, které neobsahovaly žádné sérum. Množství kolonií v nich udává 100% hodnotu.

Ředění séra, při kterém došlo k zabití 50 % pneumokoků, je označeno jako titr séra. Například pokud dojde při ředění séra 1/64 k zabití 50 % pneumokoků, je titr 1/64. V literatuře je většinou uváděna reciproční hodnota, tj. 64. Za limit účinnosti séra je považován titr 8. Séra, která dokážou při naředění 1/8 zabít 50 % pneumokoků, jsou považována za dostatečně účinná.

(van)

Zdroj: Henckaerts I., Vaccine, 2007, 25, 2518–27.

Hodnocení článku Líbí se vám článek?
Počet hodnocení: 0
Čtěte dále
Zápal plic patří k nejčastějším infekčním onemocněním s následkem smrti

Zápal plic patří k nejčastějším infekčním onemocněním s následkem smrti

Na zápal plic (pneumonii) ročně na celém světě umírají dva miliony dětí ve věku do pěti let věku. Je...

Potíže s bolavým uchem řešte okamžitě. Zánět může ohrozit sluch

Potíže s bolavým uchem řešte okamžitě. Zánět může ohrozit sluch

Zánět středního ucha je pro mnoho rodičů velkým strašákem. Přichází náhle a pohled na dítě týrané značnou bolestí je...

Příčiny zánětu středního ucha u dětí

Příčiny zánětu středního ucha u dětí

Bolesti ouška, neklid, naléhavý pláč, horečka a zhoršené pití u kojenců patří mezi projevy jedné z častých a velmi...

Je rozdíl mezi jednotlivými vakcínami proti pneumokoku?

Je rozdíl mezi jednotlivými vakcínami proti pneumokoku?

Ano, vakcíny se liší stavbou a počtem sérotypů. Nejmenší děti se očkují konjugovanými pneumokokovými vakcínami, které dokáží dítě dlouhodobě...

Pět mýtů o očkování, které mohou ohrožovat vaše děti

Pět mýtů o očkování, které mohou ohrožovat vaše děti

Možná jim věříte i vy. A možná jen kvůli těmto mýtům nechcete nechat své děti očkovat. Přitom právě díky...

Očkování, které může snížit riziko vzniku zánětu středního ucha u vašeho dítěte

Očkování, které může snížit riziko vzniku zánětu středního ucha u vašeho dítěte

Chladné dny znamenají pro populaci častější onemocnění z nachlazení a zejména to platí pro děti. Běžná rýma ale často...

Prevenar 13

 

Kalendář akcí

zobrazit vše
 
 

Ke stažení

zobrazit všechny materiály